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核酸的聚丙烯酰胺凝膠電泳的步驟

發(fā)布時間：2021-04-07 瀏覽次

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近來小編收到很多問題，其中一個就是下面小編為大家整理一下關于核酸的聚丙烯酰胺凝膠電泳的步驟的步驟，希望這些方法能夠幫助到大家。
1、按照要求將長短兩塊玻璃板一邊對齊，插入大約1.5cm寬的間隔片，板兩側及底部用1%的瓊脂糖封邊。
2、根據待分離DNA的大小配制適當濃度的聚丙烯酰胺凝膠，將裝好的玻璃電泳板傾斜成45度到60度，將配好的凝膠緩緩倒入兩玻璃板間的膠床中。
3、直至距離短玻璃板上緣約0.5cm時停止加膠，同時輕輕插入大小適合的梳子，小心取出梳子，立即用緩沖液沖洗加樣孔，并用吸水紙把加樣孔內的緩沖液吸干。
4、把膠固定于電泳槽上，加入1XTBE緩沖液，將DNA樣品與適量的上樣緩沖液混勻后，加到樣品孔內。
5、接好電，電壓設為1-8V/cm,進行電泳，當電泳結束后，切斷電源，棄去電泳儀，取出膠床板，小心移去一塊玻璃板。
6、讓凝膠吸附在另一塊玻璃板上，浸入含0.5微克的溴化乙錠溶液中，15-30min取出水洗，紫外儀下觀察結果，在凝膠成像系統拍照。

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