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聚丙烯酰胺凝膠電泳的優(yōu)點(diǎn)
聚丙烯酰胺凝膠是指由丙烯酰胺單體、作為交聯(lián)劑的亞甲基雙丙烯酰胺、四甲基乙二胺催化、自由基引發(fā)(光引發(fā)、化學(xué)引發(fā)等)聚合而成的交聯(lián)聚丙烯酰胺。是化學(xué)合成的人工凝膠。
在以聚丙烯酰胺為支持矩陣的電泳程序中,一般來說,實(shí)現(xiàn)凝膠電泳有兩種類型。
一種是單向電泳,即采用完整蛋白或經(jīng)十二烷基LS鈉(SDS)處理的蛋白單向遷移,在有凝膠的平板上平行分離(過去也用于玻璃管內(nèi)圓柱棒凝膠電泳,現(xiàn)在很少使用)。
另一種是雙向電泳, 先用蛋白質(zhì)進(jìn)行分離,然后用SDS處理凝膠板樣品進(jìn)行二方向分離。頭一次分離出各種蛋白質(zhì),于是二方向分離出蛋白質(zhì)亞基。
兩種聚丙烯酰胺凝膠電泳都有通用的優(yōu)點(diǎn)是:(1)合成聚合物,重復(fù)性好。⑵分離能力好。⑶凝膠的孔徑大小可以通過增加或減少丙烯酰胺單體和交聯(lián)劑(N,N’-亞甲基雙丙烯酰胺)的濃度來調(diào)節(jié)。⑶操作簡單,時間短。⑸化學(xué)性能穩(wěn)定,力學(xué)性能好,柔軟。(6)電泳可在酸性或堿性緩沖液中進(jìn)行,等電點(diǎn)電泳可通過加入兩性電解質(zhì)進(jìn)行,電泳可通過含有電解質(zhì)表面活i性劑(SDS)或非電解質(zhì)表面活i性劑(Np40、Tritonx-100等)的聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行。
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