核酸的聚丙烯酰胺凝膠電泳的步驟
發(fā)布時(shí)間：2021-04-07 瀏覽
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近來小編收到很多問題，其中一個(gè)就是下面小編為大家整理一下關(guān)于核酸的聚丙烯酰胺凝膠電泳的步驟的步驟，希望這些方法能夠幫助到大家。
1、按照要求將長(zhǎng)短兩塊玻璃板一邊對(duì)齊，插入大約1.5cm寬的間隔片，板兩側(cè)及底部用1%的瓊脂糖封邊。
2、根據(jù)待分離DNA的大小配制適當(dāng)濃度的聚丙烯酰胺凝膠，將裝好的玻璃電泳板傾斜成45度到60度，將配好的凝膠緩緩倒入兩玻璃板間的膠床中。
3、直至距離短玻璃板上緣約0.5cm時(shí)停止加膠，同時(shí)輕輕插入大小適合的梳子，小心取出梳子，立即用緩沖液沖洗加樣孔，并用吸水紙把加樣孔內(nèi)的緩沖液吸干。
4、把膠固定于電泳槽上，加入1XTBE緩沖液，將DNA樣品與適量的上樣緩沖液混勻后，加到樣品孔內(nèi)。
5、接好電，電壓設(shè)為1-8V/cm,進(jìn)行電泳，當(dāng)電泳結(jié)束后，切斷電源，棄去電泳儀，取出膠床板，小心移去一塊玻璃板。
6、讓凝膠吸附在另一塊玻璃板上，浸入含0.5微克的溴化乙錠溶液中，15-30min取出水洗，紫外儀下觀察結(jié)果，在凝膠成像系統(tǒng)拍照。
